分享一篇发表在Angewandte上的文章，题目为“In-Situ Spatial Visual Proteomics Enabled by Single-Cell-Type Proximity Biotinylation and Signaling Amplification”，通讯作者是来自南方科技大学的田瑞军教授，董哲教授，以及来自上海有机所的刘聪研究员，田教授的研究方向是蛋白质组学的方法学和技术研究，特别是生物医学研究方向，董教授的研究方向包括立体偶联反应，取代反应以及新型生物标记探针，刘聪研究员的研究方向聚焦于神经退行性疾病研究。

组织微环境在生理和病理过程中表现出高度异质性。空间蛋白质组学作为一种无偏倚探索工具，已受到广泛关注。现有方法如激光捕获显微切割结合质谱（LCM-MS）和抗体多重组织成像存在局限性，即它们无法在同一组织切片上同时实现高分辨率成像和原位蛋白质组分析。

开发了名为空间视觉蛋白质组学（SVPro）的新平台，其核心是设计了一种三功能探针，集成邻近标记、荧光成像和生物素化蛋白质组捕获功能。SVPro的工作流程始于免疫标记：使用抗体靶向特定细胞类型或病理标志物，并通过HRP催化产生自由基，在目标细胞附近进行蛋白质标记。探针中的炔基模块允许通过点击化学连接荧光染料，实现多色成像；而生物素模块则便于后续亲和纯化-质谱（AP-MS）分析，从而在原位获得蛋白质组数据。

​

作者首先优化了探针性能，包括探针结构，浓度、H2O2浓度和反应时间，在胰腺癌模型（KPC小鼠）中评估了标记强度、信噪比和共定位效率。SVPro随后被应用于野生型小鼠大脑切片，成功对神经元突起、胞体和星形胶质细胞进行了三维成像和蛋白质组分析。以及作者最后在阿尔茨海默病模型中，使用SVPro实现了Aβ斑块的三维形态重建和区域特异性蛋白质组分析。

总的来说，本文开发的SVPro将高分辨率成像与单细胞类型分辨率的蛋白质组分析结合，实现了厘米级组织的多色成像和深度蛋白质组覆盖。

本文作者：YDP

责任编辑：WYQ

DOI：10.1002/anie.202519440

原文链接：https://doi.org/10.1002/anie.202519440