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Nat. Chem. Biol.|全自动流动法快速合成多肽2020-01-19

大家好,这周带来一篇NCB上的文章“A fully automated flow-based approach for accelerated peptide synthesis”。

本文介绍了一种全自动流动快速合成多肽方法AFPS,传统的固相化学合成法(SPSS)合成速度慢,合成的多肽大小非常有限。本文开发的这种方法将传统的FMOC合成酰胺键过程缩短到7秒,40秒就能完成一个氨基酸残基的连接。通过UV监测FMOC的脱保护过程,一次性反应器使得反应流水线式的快速合成。

首先通过三个HPLC的泵将氨基酸,氨基酸活化试剂HATU以及DIEA混合,由控制阀门来选择不同氨基酸种类以及活化试剂,接下来流经一条加热管路被活化,再流入到90度的装有树脂的玻璃注射器中进行反应连接和脱保护,在后面连接一个UV检测器检测流出的废液来监测反应效率。

本文分别对短肽,长链肽,比较难合成的肽,异构化的氨基酸连接以及UV检测效率等几个方面进行了比较验证,均发现其速度快,节省反应物,效率高误差低等优势。

和其它几种多肽合成法相比较,有以下几点优势:1.这种流水线式的,分别储存反应物再混合的形式可以快速连续合成。2,精准的泵和阀门自动控制减少人为误差等,更高效。3.对流动相的UV监测和数据收集可以相对的定量FMOC移除数量从而监测反应效率。4.让洗脱溶剂,脱保护试剂,激活的氨基酸保持高速流动,可以加速合成过程。

文章链接:http://www.nature.com/nchembio/journal/vaop/ncurrent/full/nchembio.2318.html

文章引用:

DOI:10.1038/nchembio.2318