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有机合成TLC显色剂及使用方法2017-06-01

1.通用显色剂

 

①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110℃烤15min,不同有机化合物显不同颜色。

②0.5%碘的氯仿溶液 对很多化合物显黄棕色。

③中性0.05%高锰酸钾溶液 易还原性化合物在淡红背景上显黄色。

④碱性高锰酸钾试剂 还原性化合物在淡红色背景上显黄色。

溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。

⑤酸性高锰酸钾试剂 喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180℃加热15~20min。

⑥酸性重铬酸钾试剂 喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150℃烤薄层。

⑦5%磷钼酸乙醇溶液 喷后120℃烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。

⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂 还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。

溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。

 

2.专属性显色剂

由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:

 

(1)烃类

①硝酸银/过氧化氢

检出物:卤代烃类。

溶液:硝酸银0.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。

方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;

结果:斑点呈暗黑色。

 

②荧光素/溴

检出物:不饱和烃。

溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。

方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。

 

③四氯邻苯二甲酸酐

检出物:芳香烃。

溶液:2%四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10:1)的溶液。

方法:喷后置紫外光下观察。

 

④甲醛/硫酸

检出物:多环芳烃。

溶液:37%甲醛溶液O.2ml溶于浓硫酸l0ml。

 

(2)醇类

①3,5一二硝基苯酰氯

检出物:醇类。

溶液:I.2%本品甲苯溶液;Ⅱ.0.5%氢氧化钠溶液;Ⅲ.O.002%罗丹明溶液。

方法:先喷(I),在空气中干燥过夜,用蒸气薰2min,将纸或薄层通过试液(Ⅱ)30s,喷水洗,趁湿通过(Ⅲ)15s,空气干燥,紫外灯下观察。

 

②硝酸铈铵

检出物:醇类。

溶液:I.1%硝酸铈铵的0.2mol/L硝酸溶液;Ⅱ.N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸(128m1+25m1+1.5m1)混合液中,用前将(I)与(Ⅱ)等量混合。喷板后于105oC加热5min。

 

③香草醛/硫酸

检出物:高级醇、酚、甾类及精油。

溶液:香草醛1g溶于硫酸lOOml。

方法:喷后于120oC加热至呈色最深。

 

④二苯基苦基偕肼 ’

检出物:醇类、萜烯、羰基、酯与醚类。

溶液:本品15mg溶于氯仿25ml中。

方法:喷后于110oC加热5~lOmin。

结果:紫色背景呈黄色斑点。

 

(3)醛酮类

①品红/亚硫酸

检出物:醛基化合物。

溶液:I.0.01%品红溶液,通入二氧化硫直至无色;Ⅱ.0.05mol/L氯化汞溶液;

Ⅲ.O.05mol/L硫酸溶液。

方法:将I、Ⅱ、Ⅲ以1:1:10混合,用水稀释至l00ml。

 

②邻联茴香胺

检出物:醛类、酮类。

溶液:本品乙酸饱和溶液。

 

③2,4-二硝基苯肼

检出物:醛基、酮基及酮糖。

溶液:I.0.4%本品的2mol/L盐酸溶液; Ⅱ.本品O.1g溶于乙醇l00ml中,加浓盐酸lml。

方法:喷溶液I或Ⅱ后,立即喷铁氰化钾的2mol/L盐酸溶液。

结果:饱和酮立即呈蓝色;饱和醛反应慢,呈橄榄绿色;不饱和羰基化合物不显色。

 

④绕丹宁

检出物:类胡萝卜素醛类。

溶液:I.1%~5%绕丹宁乙醇溶液;Ⅱ.25%氢氧化铵或27%氢氧化钠溶液。

方法:先喷溶液I,再喷溶液Ⅱ,干燥。

 

(4)有机酸类

①溴甲酚绿

检出物:有机酸类。

溶液:溴甲酚绿0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氢氧化钠溶液5ml。

方法:浸板。

结果:蓝色背景产生黄色斑点。

 

②高锰酸钾/硫酸

检出物:脂肪酸衍生物。

溶液:见通用显色剂酸性高锰酸钾。

 

③过氧化氢

检出物:芳香酸。

溶液:0.3%过氧化氢溶液。

方法:喷后置紫外光(365nm)下观察。

结果:呈强蓝色荧光。

 

④2,6-二氯苯酚-靛酚钠

检出物:有机酸与酮酸。

溶液:0.1%本品的乙醇溶液。

方法:喷后微温。

结果:蓝色背景呈红色。

 

(5)酚类

①Emerson 试剂(4-氨基安替比林/铁氰化钾(Ⅲ))

检出物:酚类、芳香胺类及挥发油。

溶液:I.4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml;Ⅱ.铁氰化钾(Ⅲ)4g溶于水50ml,用乙醇稀释至100ml。

方法:先喷溶液I,在热空气中干燥5min,再喷溶液Ⅱ,再于热空气中干燥5min,然后将板置含有氨蒸气(25%氨溶液)的密闭容器中。

结果:斑点呈橙-淡红色。挥发油在亮黄色背景下呈红色斑点。

 

②Boute 反应

检出物:酚类、氯、溴、烷基代酚。

方法:将薄层置有NO2蒸气(含浓硝酸)的容器中3~10min,再用NH2蒸气(浓氨液)处理。

 

③氯醌(四氯代对苯醌)

检出物:酚类。

溶液:1%本品的甲苯溶液。

 

④DDQ(二氯二氰基苯醌)试剂

检出物:酚类。

溶液:2%本品的甲苯溶液。

 

⑤TCNE (四氰基乙烯)试剂

检出物:酚类、芳香碳氢化物、杂环类、芳香胺类。

溶液:0.5%~1%本品的甲苯溶液。

⑥Gibb’s(2,6-二溴苯醌氯亚胺)试剂

检出物:酚类。

溶液:2%本品的甲醇溶液。

 

⑦氯化铁

检出物:酚类、羟酰胺酸。

溶液:1%~5%氯化铁的0.5mol/L盐酸溶液。

结果:酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。

 

(6)含氮化合物

①FCNP(硝普钠/铁氰化物)试剂

检出物:脂 肪族含氮化物,如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物,肌酸及肌酐。

溶液:10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液、10%铁氰化钾溶液与水按1:1:1:3混合,在室温至少放置20min,冰箱保存数周,用前将混合液与丙酮等体积混合。

 

②Dragendorff(碘化铋钾试剂)试剂

检出物:芳香族含氮化合物,如生物碱类、抗心律不齐药物。

溶液:I.碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中;Ⅱ.碘化钾8g溶于水20ml中。

将上述溶液I及Ⅱ等量混合,置棕色瓶中作为储备液,用前取储备液lml、冰醋酸2ml与水l0ml混合。

结果:呈橘红色斑点。

 

③4-甲基伞形酮

检出物:含氮杂环化合物。

溶液:本品0.02g溶于乙醇35ml,加水至100ml。

方法:喷板后置25%氨水蒸气的容器中,取出后于紫外灯(365nm)下观察。

 

④碘铂酸钾

检出物:生物碱类及有机含氮化物。

溶液:10%六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合,加6%碘化钾溶液,混匀。临用前配制。

 

⑤硫酸高铈铵/硫酸

检出物:生物碱及含碘有机化物。

溶液:硫酸铈1g混悬于4ml水中,加三氯乙酸1g,煮沸,逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。

方法:喷后薄层于1l0oC加热数分钟。

结果:阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出。

 

⑥Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛/盐酸)试剂

检出物:吲哚衍生物及胺类。

溶液:1%本品的浓盐酸溶液与甲醇按1:1混合。

方法:喷后板于50oC加热20min。

结果:呈不同颜色的斑点。

 

(7)胺类

①硝酸/乙醇

检出物:脂肪族胺类。

溶液:50滴65%硝酸于乙醇100ml中。

方法:需要时120oC加热。

 

②2,6-二氯醌氯亚胺

检出物:抗氧剂、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、药物、苯氧基乙酸除草剂等。

溶液:新鲜制备的0.5%~2%本品乙醇溶液。

方法:喷后薄层于110oC加热10min,再用氨蒸气处理。

 

③茜素

检出物:胺类。

溶液:O.1%本品的乙醇溶液。

 

④丁二酮单肟/氯化镍

检出物:胺类。

溶液:I.丁二酮单肟1.2g溶于热水35ml中,加氯化镍0.95g,冷却后加浓氨水2ml;

Ⅱ.盐酸羟胺0.12g溶于200ml水中。

方法:将溶液I及Ⅱ混合,放置1天,过滤。

 

⑤Pauly (对氨基苯磺酸)试剂

检出物:酚类、胺类和能偶合的杂环化合物。

溶液:磺酸4.5g溶于温热的12mol/L盐酸45ml中,用水稀释至500ml,取lOml于冰中冷却,加4.5%亚硝酸钠冷溶液lOml,于OoC放置15min。用前加等体积10%碳酸钠溶液。

 

⑥硫氰酸钴(Ⅱ).

检出物:生物碱、伯、仲、叔胺类。

溶液:硫氰酸铵3g与氯化钴1g溶于水20ml。

结果:白色至粉红色背景上呈蓝色斑点,2h后颜色消退。若将薄层喷水或放入饱和水蒸气容器内,可重现色点。

 

⑦1,2-萘醌-4-磺酸钠

检出物:芳香胺类。

溶液:本品0.5g溶于95ml水,加乙酸5ml,滤去不溶物即得。

方法:喷后反应30min显色。

 

⑧葡萄糖/磷酸

检出物:芳香胺类。

溶液:葡萄糖2g溶于85%磷酸l0ml与水40ml混合液中,再加乙醇与正丁醇各30ml。

方法:喷后于115℃加热l0min。

 

(8)硝基及亚硝基化合物

①α-萘胺

检出物:3,5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。

溶液:I.O.5%α-萘胺乙醇溶液;

Ⅱ.10%氢氧化钾甲醇溶液。

方法:先喷溶液I,再喷溶液Ⅱ。

结果:呈红褐色斑点。

②二苯胺/氯化钯

检出物:亚硝胺类。

溶液:1.5%二苯胺乙醇溶液与0.1g氯化钯的0.2%氯化钠溶液lOOml,按5:1混合。

方法: 喷后置紫外光(254nm)下观察。

结果:显紫色斑点。

 

(9)氨基酸及肽类

①茚三酮

检出物:氨基酸、胺与氨基糖类。

溶液:本品O.2g溶于乙醇l00ml中。

方法:喷后于110oC加热。

结果:呈红紫色斑点。

 

②茚三酮/乙酸镉

检出物:氨基酸及杂环胺类。

溶液:茚三酮1g及乙酸镉2.5g溶于l0ml冰醋酸中,用乙醇稀释至500ml。

方法:喷后于120oC加热20min。

 

③1,2-萘醌-4-磺酸钠

检出物:氨基酸。

溶液:临用前将本品O.02g溶于5%碳酸钠l00ml中。

方法:喷后室温干燥。

结果:不同氨基酸呈不同色点。

 

④靛红/乙酸锌

检出物:氨基酸与某些肽类。

溶液:靛红1g与乙酸锌1g溶于95%异丙醇l00ml中,加热至80oC,冷却后加乙酸1ml,冰箱保存。

方法:喷后于80~85″C加热30min。

 

⑤茚三酮/冰醋酸

检出物:二肽及三肽。

溶液:1%茚三酮吡啶溶液与冰醋酸按5:1混合。

方法:喷后于l00oC加热5min。

 

⑥香草醛

检出物:氨基酸及胺类。

溶液:I.本品1g溶于丙醇50ml中;

Ⅱ.1mol/L氢氧化钾溶液lml,用乙醇稀释至lOOml。

方法:先喷溶液I后于110oC干燥l0min,再喷溶液Ⅱ,于110oC再干燥l0min,于紫外光(365nm)下观察。

 

(10)甾类

①香草醛/硫酸

检出物:甾体激素。

溶液:1%香草醛浓硫酸溶液。

方法:喷后于105℃加热5min。

 

②氯化锰

检出物:雌激素类。

溶液:氯化锰0.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。

方法:喷后置紫外光(365nm)下观察。

 

③高氯酸

检出物:甾体激素。

溶液:5%高氯酸甲醇溶液。

方法:喷后于110oC加热5min,置紫外光(365nm)下观察。

 

④三氯化锑/乙酸

检出物:甾类与二萜类。

溶液:三氯化锑20g溶于乙酸20ml与氯仿60ml混合液中。

方法:喷后于100oC加热5min,紫外光长波下观察。

结果:二萜类斑点呈红黄-蓝紫色。

 

⑤对甲苯磺酸

检出物:甾族化合物、黄酮类与儿茶酸类。

溶液:20%本品的氯仿溶液。

方法:喷后于100oC加热数分钟,紫外光长波下观察。

结果:斑点呈荧光。

 

⑥氯磺酸/乙酸

检出物:三萜、甾醇与甾族化合物。

溶液:氯磺酸5ml在冷却下加乙酸l0ml溶解。

方法:喷后于130oC加热5~l0min,置紫外光长波下观察。

结果;斑点显荧光。

 

(11)糖类

①茴香胺、邻苯二酸试剂

检出物:碳氢化合物。

溶液:1.23g茴香胺及1.66g邻苯二酸于l00ml 95%乙醇中的溶液。

方法:喷雾或浸渍。

结果:己糖呈绿色、甲基戊糖呈黄绿色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。

 

②四乙酸铅/2,7一二氯荧光素

检出物:甙类、酚类、糖酸类

溶液:I.2%四乙酸铅的冰醋酸溶液;Ⅱ.1%2,7一二氯荧光素乙醇溶液。

取溶液I、Ⅱ 各5ml混匀,用干燥的苯或甲苯稀释至200ml,试剂溶液只能稳定2h。

方法:浸板。

 

③邻氨基联苯/磷酸

检出物:糖类。

溶液:O.3g邻氨基联苯加85%磷酸5ml与乙醇95ml。

方法:喷板后llOoC加热15~20min。

结果:斑点呈褐色。

 

④苯胺/二苯胺/磷酸

检出物:还原糖。

溶液:4g二苯胺、4ml苯胺与20ml 85%磷酸共溶于200ml丙酮中。

方法:喷后于85℃加热l0min。

结果:产生各种颜色。1,4-己醛糖、低聚糖呈蓝色。

 

⑤双甲酮/磷酸

检出物:酮糖。

溶液:双甲酮(5,5-二甲基环己烷-1,3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇与l0ml 85%磷酸中。

方法:喷板后于110oC加热15~20min。

结果:日光下观察,白色背景上呈黄色斑点,紫外光长波下呈蓝色荧光。

 

⑥联苯胺/三氯乙酸

检出物:糖类。

溶液:0.5g联苯胺溶于l0ml乙酸,再加10ml40%三氯乙酸水溶液,用乙醇稀释至l00ml。

方法:喷后置紫外光下照射15min。

结果:斑点呈灰棕-红褐色。

 

⑦对二甲氨基苯甲醛/乙酰丙酮

检出物:氨基糖类。

溶液:I. 5ml 50%氢氧化钾溶液与20ml乙醇混匀,取此溶液0.5ml,加乙酰丙酮0.5ml与正丁醇50ml的混合液l0ml,此两种溶液均需新鲜配制,临用前混合;

Ⅱ. 1g对二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中,再加30ml浓盐酸,需要时此溶液可用正丁醇180ml稀释。

方法:先喷I后于105oC加热5min,再喷Ⅱ,然后于90℃干燥5min。

结果:斑点呈红色。

 

 

 

 

 

 

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