在缺乏特定蛋白质目标物的情况下,由于两条DNA探针上LAR模板和引物的互补序列很短,无法自发地组装形成双链,因此LAR不会启动。在添加蛋白质目标物后,两条DNA探针上偶联的亲和配体可以同时识别蛋白质,导致两条DNA探针非常接近,此时探针中模板和引物结构域的局部浓度显著增加,并诱导模板和引物在蛋白质上形成双链,构成稳定的闭环结构,然后在酶的帮助下,LAR反应沿着模板链发生。随后在内切酶作用下产生显著增强的荧光信号(NESA)。
Changjia Hu, Jie Zhang, Yanwen Jin, Wenjie Ma, Rongxing Zhou, Huan Du, Peng Yang, Xiandeng Hou, Nansheng Cheng, Junbo Chen
ChemBioChem
DOI: 10.1002/cbic.202100548