分享一篇发表在JACS上的文章，题目为“Chemoselective Tagging of Protein Methacrylation”，通讯作者是来自武汉大学的陈素明教授，他的研究方向聚焦于化学与生物质谱。这篇文章中，作者开发了一种甲基丙烯酰化修饰的化学选择性标记策略。

蛋白质赖氨酸甲基丙烯酰化（Kmea）是一种最近发现的新型翻译后修饰，是巴豆酰化（Kcr）的同分异构体。由于缺乏高效的富集方法，鉴定Kmea修饰位点目前仍面临挑战。于是作者开发了一种光催化Michael加成反应用于对Kmea的化学选择性共价标记。

作者利用了在温和条件下，硫醇自由基和缺电子烯烃之间的反应，实现选择性标记Kmea。与Kmea相比，Kcr的β碳原子具有更大的空间位阻，并且生成的仲碳自由基更不稳定，因此可以利用这种双重效应实现对Kmea的选择性反应。于是作者选择苯硫醇衍生物作为自由基前体，2,4,6-三芳基吡喃盐作为光催化剂，在甲基丙烯酰胺模型化合物上测试反应体系。结果表明，光催化Michael加成反应对甲基丙烯酰胺的标记具有化学选择性。

随后，作者希望将这一反应应用在蛋白质Kmea修饰标记和富集中。作者设计了一种水溶性苯硫醇叠氮探针，在纯蛋白上测试探针对Kmea的标记能力。胶内荧光和质谱结果都表明，该探针对蛋白质Kmea的标记具有高反应性和选择性。

最后，作者将方法应用于内源Kmea位点的鉴定。通过探针富集，作者在小牛胸腺细胞和Hela细胞中鉴定到包括组蛋白在内的多个Kmea修饰蛋白及修饰位点。

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总的来说，本篇文章开发了一种针对蛋白质甲基丙烯酰化的化学选择性标记方法，实现了蛋白质组中甲基丙烯酰化的特异性位点鉴定。

本文作者：LCX

责任编辑：LZ

DOI：10.1021/jacs.5c13826

原文链接：https://doi.org/10.1021/jacs.5c13826